荧光素
英文名称:fluorescein
定义:在蓝光或紫外线照射下,发出绿色荧光的一种黄色染料。用于荧光抗体技术中的
荧光染料。
应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞生物学技术(二级学科)
荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多。目前常用于标记抗体的荧光素
有以下几种:异硫氰酸荧光素,四乙基罗丹明,四甲基异硫氰酸罗丹明,酶作用后产生
荧光的物质。
中文名称:荧光素
中文别名:荧光黄;荧光橙红;二羟基荧烷
英文名称:Fluorescein
英文别名:Acid Yellow 73
CAS号:2321-07-5
分子式:C20H12O5
分子量:332.31
等级:BS
MDL号:MFCD00005050
Beilstein号:94324
EC号:219-031-8
性状描述黄红色至红色粉末,溶于热乙醇、冰乙酸、碳酸碱和氢氧化碱,并显亮绿色荧
光,不溶于水、苯、氯仿和乙醚;*吸收波长493.5、460nm。
用途说明吸附指示剂;氧化还原指示剂;荧光光度分析硫离子;滴定氯、溴和碘
防冻液重要的颜料,可使防冻液呈现出绿色荧光。
贮藏运输密封保存
危险说明安全等级:22-24/25
简介荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多种类目前常用于标记抗体的
荧光素有以下几种。
1.异硫氰酸荧光素
(fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水
和酒精溶剂。有两种异构体,其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都
更优良。FITC分子量为389.4,*吸收光波长为490~495nm,*发射光波长为520~
530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年,是目前应用最广泛的
荧光素。其主要优点是人眼对黄绿色较为敏感,通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
2.四乙基罗丹明
(rhodamine, RB200) RB200为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性质稳定,
可长期保存。*吸收光波长为 570nm,*发射光波长为595~600nm,呈现橘红色荧
光。
3.四甲基异硫氰酸罗丹明
(tetramethyl rhodamine isothiocynate, TRITC) TRITC为罗丹明的衍生物,呈紫红色
粉末,较稳定。*吸收光波长为 550nm,*发射光波长为620nm,呈现橙红色荧光
,与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,
也可用于单独标记染色。
4.酶作用后产生荧光的物质
某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如,4-甲基伞
酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光
波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根
过氧化物酶的底物对羟基*等。 5.镧系螯合物 某些3价稀土镧系元素如铕
(Eu3+)、铽 (Tb3+) 等的螯合物可发射特征性的荧光,而且激发光波长范围宽、发射光
波长范围窄、荧光衰变时间长,最适合于时间分辨荧光免疫测定。